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  2. 拉曼光譜實(shí)用問答集錦!
    2019-01-29 12:23:12 分享至:


        (2)你用的是共聚焦Raman嗎?聚焦點(diǎn)要在毛細(xì)管的溶液里面才好??梢栽谌芤褐蟹劈c(diǎn)“雜物”方便聚焦。


        (3)玻璃是無定形態(tài)物質(zhì),應(yīng)該Raman信號比較弱才對。


        三。我們這里有做生物樣品的拉曼光譜的,在獲得的圖里面有很強(qiáng)的熒光,有的說,如果拉曼得不到就用其熒光譜??晌蚁雴栆幌?,在拉曼譜里面得到的熒光背景,是真正的熒光特征譜嗎?這和熒光光譜儀里面的熒光圖有什么區(qū)別?


        1.原則上說,拉曼譜中的熒光和熒光譜中的熒光是一樣的,只要激發(fā)波長和功率密度相同。注意橫坐標(biāo)要從波數(shù)變換為納米,即用10000000nm(1cm)除以波數(shù)就行了。但有一點(diǎn)要注意,不同波長的激發(fā)光照射樣品,得到的拉曼相近,但熒光可以有很大不同,甚至相同波長不同功率激發(fā),熒光譜都大不一樣。


        2.“注意橫坐標(biāo)要從波數(shù)變換為納米,即,用10000000nm(1cm)除以波數(shù)就行了”?


        Raman測定的是散射光,得到的是Raman shift.Raman shift和絕對波長(熒光光譜)之間要一個(gè)轉(zhuǎn)換的吧。


        3.生物樣品一般熒光峰比較寬,用熒光光測試之前一般先會做儀器本身曲線校正也就是儀器本身的響應(yīng)曲線,這樣測出的熒光峰才比較準(zhǔn),特別是對于寬峰更要做這個(gè)較準(zhǔn)。


        而Raman光譜一般采集的區(qū)域比較窄(指的是波長區(qū)域),一般在窄的波長范圍變化不大,因此一般不考慮儀器本身響應(yīng)曲線誤差,但是Raman光譜來測寬熒光峰,影響就比較大。


        四。什么是共焦顯微拉曼光譜儀?


        1.共焦拉曼指的是空間濾波的能力和控制被分析樣品的體積的能力。通常主要是利用顯微鏡系統(tǒng)來實(shí)現(xiàn)的。


        僅僅是增加一個(gè)顯微鏡到拉曼光譜儀上不會起到控制被測樣品體積的作用的—為達(dá)到這個(gè)目的需要一個(gè)空間濾波器。


        2.顯微是利用了顯微鏡,可以觀測并測量微量樣品,最小1微米左右;


        (2)共焦是樣品在顯微鏡的焦平面上,而樣品的光譜信息被聚焦到CCD上,都是焦點(diǎn),所以叫共聚焦。


        3.拉曼儀器的共焦有2種呢,一種是針孔共焦,一種是贗共焦。我覺得好像不應(yīng)該稱為贗共焦,共聚焦有真正的定義說一定要針孔才是共聚焦嗎?好像沒有,頂多稱為傳統(tǒng)共聚焦或者針孔共聚焦、簡單共聚焦之類的。(個(gè)人想法,大家指正。)

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